吖啶橙染色液（AO）

产品简介：

吖啶橙（Acridine Orange，AO）为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核 DNA 和 RNA 染色。其激发波长为 488nm，吸收波长为 515nm。它与细胞中 DNA 和RNA 结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为 AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为 AO-RNA 或单链 DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。 吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙 AO 常与溴化乙啶 EB 合用双染，因 EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

产品应用：

流式细胞仪/荧光显微镜/激光共聚焦

使用方法：

1.本染色液用于细胞染色分析，也可用于细胞涂片的检测。以下以培养细胞的荧光显微镜检测为例，细胞染色可用预冷的 70%的乙醇固定，4℃，1—2 小时，也可不固定，其他方法请参阅相关资料。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后请尽快检测。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

5.AO 有毒，操作时要戴上手套。

1、收集细胞，PBS 洗涤细胞一次，2000rpm 离心 5 分钟，用 PBS 重悬细胞，调整细胞浓度约为 106 个/ml；

2、取 100ul 细胞悬液，加入 5ul 吖啶橙染液，轻轻混匀；

3、混匀后 4℃避光放置 10-15 min 后，滴加于载玻片上，加盖玻片；

4、荧光显微镜检测。

5、荧光显微镜检测结果。最大激发波长为 488nm。

结果分析 ：

在荧光显微镜下，选用 488nm 激发光镜检：AO 染色正常细胞 DNA 呈均匀黄色或黄绿色。当细胞凋亡时，染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒或黄绿色碎片。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。