土壤脂肪酶（S-LPS)测试盒

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

LPS 又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理：

LPS 催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算 LPS 活性。

自备仪器和用品：

研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯 100mL、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体 90mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体 14mL×1 瓶，4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡 20min。

试剂三：甲苯 100mL×1 瓶，4℃保存（自备）。

试剂四：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。

标准品：液体 10μL×1 瓶，10 µmol/mL 的标准溶液，4℃保存。临用前加入 3.168 mL 甲苯，充分溶解。

样本处理

建议称取约 0.1g 土样，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，再用回旋式振荡器振荡提取 15min，4℃，4000g 离心 10min，取上清待测。

S-LPS 测定操作：

37℃振荡反应 5 min 后，静置 5min，取 800μL 上层液加入 1 mL 玻璃比色皿，于 710nm 处测定吸光值。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

S-LPS 活性计算公式：

活性单位定义：37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成 1μmol 脂肪酸为一个酶活单位。

S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）÷T=16×[(A 测定管－A 空白管)÷（A 标准管- A 空白管）]÷WC 标准品：10 µmol/mL；V 反总：反应总体积，2mL；V 样：反应中加入样本体积，0.125mL；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，g；T：催化反应时间，10 min。