在线客服
热线电话

微信公众号

企业微信
我的购物车 0

外泌体RNA分离试剂盒 BES2003REXO

是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡 (Extracellular Vesicles,EVs)。

销售价
¥ 1400.00 /盒
  • 累计评价

    0
  • 累计销量

    0
配送至
请选择地址
可配送 快递:免邮
服务
博尔森生物科技有限公司-科研服务一站式网站发货并提供售后服务

数量
+ -
库存20盒
二维码图片
商家服务
优质服务 售后无忧
高效物流 安全配送
一站式采购
会员特权 优惠不断
文献奖励

看了又看

  • 外泌体RNA提取试剂 BES2005DEXO

    ¥1600.00

  • 外泌体DNA提取试剂盒 BES2004DEXO

    ¥1333.00

  • 外泌体DNA分离试剂盒 BES2003DEXO

    ¥1400.00

外泌体RNA分离试剂盒

保存与应用 

【保存条件】 

本试剂盒低温下运输,室温或 2-8℃下保存至少一年(按照试剂盒不同成分分别 保存),使用前请详细阅读说明书。

【应用范围】

本产品只用于科学研究,不能用于临床诊断。

产品介绍

外泌体(Exosome)是由不同细胞分泌的直径 30-150nm 的胞外膜性囊泡 (Extracellular Vesicles,EVs)。外泌体普遍存在于多种体液中,其内容物丰富, 包括蛋白质、脂质和核酸等,在细胞间信息交流中发挥着重要作用,主要参与免 疫抗原呈递,神经递质传递,脂类代谢及细胞信号转导等过程,并与多种疾病的 发生、发展、治疗及预后密切相关。
研究表明,胞外膜性囊泡(包括外泌体)内容物中富含不同类型 RNA(mRNA、 microRNA、LncRNA、CircRNA 等)。microRNA(miRNA)在基因转录和转录 后调节方面起重要作用,与疾病的发生、发展密切相关,因此,某些外泌体 miRNA (exo-miRNA)可以作为疾病的新的治疗靶标和诊断生物标记物。
外泌体 RNA 分离试剂盒(Exosome RNA Isolation Kit)采用酚/胍盐方法提 取已分离的外泌体中总 RNA(含有 miRNA),这里外泌体分离方法可以包括超 速离心、化学沉淀、免疫捕获和分子大小排阻等,接下来采用核酸特异吸附柱 (Spin Columns),可方便、快捷地纯化和洗脱外泌体 RNA,可直接用于下游应 用,如 RT-qPCR,Northern blot,芯片表达谱,NGS 测序等。

试剂盒组成和说明

2022092110291664536

2022092110285955854

*使用前先在每瓶洗涤液 A (Wash Solution A)中加入 45ml 无水乙醇,混匀,并在瓶标签上标 记“√”,每次使用后立即盖紧瓶盖。操作方法

 【注意事项】
1. 除了裂解液 A (Lysis Buffer A)保存在 2-8℃外,其余试剂盒和耗材保存在 室温下(15-25oC),自购买之日起有效期至少一年。裂解液 A 在使用前检查是否 有盐沉淀,建议在使用前 37℃水浴 10 分钟,混合均匀,无沉淀,溶液清澈。
2. 预防 RNase 污染,应注意以下几方面:
经常更换新手套,防止皮肤表面 RNase 污染。
使用无 RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
RNA 释放后在裂解液中不会被 RNase 降解,但提取后继续处理过程中应使 用不含 RNase 的塑料盒或玻璃器皿,玻璃器皿可在 150℃烘烤 4h,塑料器皿 可在 0.5M NaOH 中浸泡 10 min,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除 RNase。
配制溶液应使用无 RNase 的水(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入 DEPC 至 终浓度 0.1%(v/v),放置过夜,高压灭菌)。 3. 需要自备试剂:96-100% 乙醇。

操作方法
2022092110303748450

注意:使用前先在每瓶洗涤液 A (Wash Solution A)中加入 45ml 无水乙醇,混匀,并在瓶标 签上标记“√”,每次使用后立即盖紧瓶盖。
1. 外泌体 RNA 释放

取 300μl 分离的外泌体溶液,加入等体积(300μl)的裂解液 A,涡旋振荡 30sec,
室温放置 5min,使得核酸蛋白复合物完全分离。  室温 12,000×g 离心 10min,取上清,转入一个新的无 RNase 的离心管中。
加入 150μl 裂解液 B,盖好管盖,剧烈振荡 15sec,室温放置 5min。室温 12,000×g 离心 15min,样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水 相,RNA 主要在水相中(上层),把水相转移到新管中(避免吸取中间层), 进行下一步操作。
量取转移液的体积,缓慢加入 1.5 倍体积预冷的无水乙醇(如 400μl 的转移 液加 600μl 无水乙醇),混匀(此时可能会出现沉淀)后室温静置 5-10min。
注意:样本及裂解液 A 在使用前应恢复室温,为了提高提取效率建议裂解液 A 使用前 37℃ 水浴 10 分钟后使用。当裂解液 A 加入后出现核酸蛋白复合物未完全解离的现象,可额外补 加 100μl 裂解液 A。

2. 外泌体 RNA 分离

将得到的溶液和沉淀一起转入吸附柱中(吸附柱放入收集管中,当溶液总体 积超过 700μl 时,可分两次完成),室温放置 2min,室温 8,000×g 离心 30sec,离 心后弃掉滤液,保留吸附柱。

3. 外泌体 RNA 洗涤

向吸附柱加入 500μl 洗涤液 A(请检查是否已加入指定量的无水乙醇),室 温 8,000×g 离心 30sec,倒掉收集管中的滤液,将吸附柱放入收集管中。重复洗 涤 1 次后,空柱室温 12,000×g 再离心 2min,去除残余液体。打开吸附柱盖子, 将吸附柱置于室温放置数分钟(5-10min),以彻底晾干吸附材料中残余的洗涤 液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中的残余的洗涤液去除,洗涤液中的乙醇的残留会影响后续 的酶反应(酶切、PCR 等)实验。

4.外泌体 RNA 洗脱

将吸附柱转入 1.5 ml 离心管中(试剂盒提供),向吸附柱中间位置悬空滴加 50-200μl 洗脱液 A,室温放置 2-5min,室温 12,000×g 离心 2min,将溶液收集到 离心管中。
注意:洗脱液体积不应小于 50μl,体积过小影响回收效率,为增加 RNA 的得率,可将离心得到的溶液再加入吸附柱中,室温放置 2min,12,000×g 离心 2min。洗脱液的 pH 对于洗脱 效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证 pH 值在 7.0-8.5 范围内,pH 值低于 7.0 会降低洗 脱效率,且 RNA 产物最好立即使用,或保存在-80℃,以防止 RNA 降解。

用途:该产品仅验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。



因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

  • 全部
  • 商品咨询
  • 支付问题
  • 发票及保修