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吖啶橙(AO)染色液 BES2211OST

吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记 DNA、RNA,属于异染性荧光染料。

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吖啶橙(AO)染色液

英文名:AO Stain Kit

储存条件:2-8℃

产品简介:

吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记 DNA、RNA,属于异染性荧光染料。该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核 DNA 和 RNA 染色。因此 AO 常用于细胞内 DNA 和 RNA 进行检测。AO 与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO 嵌入核酸双链的碱基对之间, 这种结合方式主要为 AO 与 DNA 的结合,其荧光发射峰为 530nm,激发后呈绿色荧光;2、静电吸 引,带正电荷的 AO与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为 AO 与 RNA 的结合,其荧光发射峰为 640nm,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧 光。因此,吖啶橙嵌合到双链DNA 分子中显绿色,与 DNA 单链或 RNA 结合时发桔黄色或橙红色荧光。

吖啶橙染色液(1mg/ml)为储存液,使用时应稀释到合适浓度后使用。染色后在荧光显微镜下观 察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固 缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片 颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙染色常与 EB 染色合用双染,因 EB 只染死细胞使 之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

自备材料:

荧光显微镜,低速离心机 ,PBS,细胞计数板 ,载玻片、盖玻片

操作步骤(仅供参考):

1. 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用 PBS 清洗细胞 1 次,计数并调节细胞浓 度至106/ml。

2. 取适量的细胞悬液,加入 Acridine Orange Stain(1mg/ml),使 AO 终浓度为 8.5~17µg/ml,轻轻混 匀。

3. 室温避光染色 15~20min,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。

4. 荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 488nm,阻断滤光片波长 515nm),计数并拍照。

注意事项:

1. Acridine Orange Stain(1mg/ml)不含破膜剂,较少单独使用。

2. 吖啶橙染色常与 EB 染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

3. 如有低温离心机进行离心效果更佳。

4. 操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。

5. 试剂有一定毒性,请小心操作。

6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。


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