DAPI染色试剂盒

产品简介：

DAPI 染色试剂盒用于普通的细胞核染色，也可用于细胞凋亡检测以及某些特定情况下的双链 DNA 染色，染色后可用荧光显微镜检测或激光共聚焦或流式细胞仪检测。

 DAPI (diamidino-2-phenylindole) 能与双链 DNA 小槽，特别是 AT 碱基结合，也可插入少于3 个连续 AT 碱基对的 DNA 序列中。当它与双链 DNA 结合时，荧光强度增强 20 倍，而与单链 DNA 结合则无荧光增强现象，因此是一种简易、快速和敏感地检测 DNA 的方法。

 DAPI 的荧光强度较 Hoechst 低，但荧光稳定性优于 Hoechst；其特异性较溴化乙啶和碘化丙啶高。

产品应用：

1.流式细胞仪

2.激光共聚焦

3.荧光显微镜

使用方法：

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

5.本染色液可用于培养细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。

6.根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法，只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。

7.活细胞原位染色不同细胞需要的时间差异较大，可能需要较长时间，可将染液加入培养基后避光孵育 30 分钟-4 小时，或更长时间。

8.以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色不需要固定，也可以固定后染色。以下方法仅供参考，也可以请参阅相关资料使用其他方法。

1. 染色工作液的配制：

根据样品数用 PBS 将 DAPI 染色液 10-100 倍稀释，配制成染色工作液。

2. 细胞爬片/涂片的制备：

贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用 4%多聚甲醛固定 5min。

对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，500-1000g 离心 5 分钟收集细胞，用 PBS 洗 2 次，收集调整细胞数为 1X105/ml，涂片或用离心涂片，用 4%多聚甲醛固定 5min；

3. 用 PBS 洗涤涂片两次。

4. 加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色 5-30 分钟。

5. 吸除染色液。

6. 用 1X 洗涤液洗涤涂片。

7. 用荧光显微镜检测结果。

染料-DNA 复合物的最大激发波长为 360nm，最大发射波长为 454nm。

结果分析 ：

置于荧光显微镜下用 360nm 激发光观察结果：DAPI 染色呈蓝白色荧光。

早期凋亡细胞呈现核浓缩，染色加深，或核染色质呈新月形聚集于核膜一边；晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体，并被细胞膜所包绕，即凋亡小体。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。