吖啶橙染色试剂盒

产品简介：

吖啶橙（Acridine Orange，AO）为一种荧光染料，该染料具有膜通透性，能透过细胞膜，使核 DNA 和 RNA 染色。其激发波长为 488nm，吸收波长为 515nm。它与细胞中 DNA 和 RNA结合量存在差别，复合物可发出不同颜色的荧光，红色荧光为 AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为 AO-RNA 或单链 DNA(F>530nm)。因此，在荧光显微镜下观察，吖啶橙可透过正常细胞膜，使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光；而在凋亡细胞中，因染色质固缩或断裂为大小不等的片断，形成凋亡小体。吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光，或黄绿色碎片颗粒；而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。吖啶橙 AO 常与溴化乙啶 EB 合用双染，因 EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光，由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。

产品应用：

1.流式细胞仪

2.荧光显微镜

使用方法：

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

1、 染色缓冲液的配制：

根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。 取 100μL 试剂 B 加 900μL 无菌去离子水稀释，混匀即成染色缓冲液。

2、 收集样本细胞，细胞数量在 10X105 个以内。

3、 用 PBS 洗涤细胞两次。

4、 用 500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬，使细胞浓度约 106 个/ml。

5、 取 95ul 细胞悬液，加入 5ul AO 染色液。

6、 轻轻混匀后 4℃避光孵育 10-15 分钟。

7、 滴加至载玻片上，用盖玻片封片。

8、 荧光显微镜检测结果。最大激发波长为 488nm。

结果分析 ：

在荧光显微镜下，选用 488nm 激发光镜检：AO 染色正常细胞 DNA 呈均匀黄色或黄绿色。当细胞凋亡时，染色质浓缩，细胞核碎裂成点状，被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒或黄绿色碎片。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。