Bradford 蛋白定量试剂盒
产品简介:
Bradford 法(考马斯亮蓝法),是目前灵敏度最高的蛋白质测定法之一。当 Bradford 染色液(考马斯亮蓝 G250)和蛋白在酸性条件下结合时,溶液颜色由棕黑色转为蓝色,最大吸光值波长由 456nm 转至 595nm,吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系,通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓度,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。
Bradford 染色液为 2 倍浓缩母液,便于储存。
Bradford 法测定受样品中去垢剂的影响,如果蛋白样品中含有高浓度的去垢剂,可以选用BCA 法的试剂盒。
BCA 法快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞蛋白提取过程中,常用浓度的去垢剂 SDS,Triton X-100,Tween 不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于 Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down 实验的试剂盒等总计 300 多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。
产品应用:
蛋白定量
使用方法:
1.Bradford 法对于去污剂敏感的,受高浓度去垢剂影响。需确保 SDS 低于 0.1%,Triton X-100 低于0.1%,Tween 20,60, 80 低于 0.06%。含去垢剂的样品推荐使用 BestBio 的 BCA 蛋白浓度测定试剂盒。
2.染色液使用前请混匀。
3.将 G250 染色液放置到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
A. 96 孔酶标板测定:
1. 蛋白标准工作液配制:
根据样品数量配制相应体积的蛋白标准工作液。将蛋白标准储存液用双蒸水 5 倍稀释,配成 1mg/ml 的工作液。
2. 标准曲线绘制。
取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:
3. 振荡混匀后,室温放置 5-10 分钟。
4. 用酶标仪测定 A595,以不含 BSA 的光吸收值为空白对照。
5. 以蛋白含量(g)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
6. 样品测定:
将待测蛋白样品用纯水稀释至适当浓度,取 10l 样品,加入 100l 2x Bradford 染色液和 90l 的纯水,混匀后放置 5-10 分钟,然后以 0 号孔为对照,测定样品吸收值 A595。
【注】:
必须用纯水补足体积,不能用 PBS 等 buffer。
7. 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
8. 计算蛋白浓度:
以查得的蛋白含量除以样品体积 10l,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
B. 比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。