ECL化学发光检测试剂盒

产品简介：

ECL 试剂盒以化学发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是，蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以一抗及辣根过氧化物酶 HRP 标记的二抗结合膜上的目的蛋白，或以 HRP 标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的 ECL 工作液，在可见光下室温孵育膜数分钟，将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于 X 光片曝光暗盒。然后转入暗室将 X 光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在 X 光胶片上。也可不进行 X 光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光 CCD 扫描。

 ECL 试剂盒采用高品质进口原料，经大量样本实验验证优化配方。稳定性高，检测方便，可检测 pg 级的抗原。

 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。

使用方法：

1.ECL 工作液配制过程中吸取试剂 A 和试剂 B 时务必跟换吸头，工作液新鲜配制后立即使用，放置过久会影响灵敏度。

2.根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。

3.曝光时间过长会使背景加深，曝光不足会导致条带模糊。

4.如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和曝光。

5.必须使用高质量保鲜膜。

1. 使用合适的方法进行 Western Blot，直至用 PBST 洗涤二抗。

2. 配制新鲜 ECL 工作液：试剂 A 和试剂 B 按 1:1 混合均匀后即为 ECL 工作液。

3. 印迹膜蛋白面朝上，用 ECL 工作液均匀滴加至印迹膜使其完全覆盖。ECL 工作液使用量大约为

0.125ml/cm2 膜或根据个人实验习惯使用。

4. 用平头镊夹住印迹膜，垂直置于吸水纸以吸去自然流下的多余工作液，注意不能让膜完全干掉。

5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间，尽量赶尽气泡。

6. 将印迹膜蛋白面朝上，放于 X 光胶片暗盒内。

7. 在暗室内放入 X 光片，曝光，显影

常见问题分析：

1.为什么会发生光淬灭？

抗原浓度太高，局部过多的 HRP 会快速消耗底物，导致光信号过强，条带呈灼烧样。可降低抗原上样量。

操作时间过长，膜逐渐干掉。避免膜干掉。

不良的实验习惯导致设备或试剂污染。例如铁锈和不慎沾染的显影液、定影液，会造成光淬灭，甚至直接导致无荧光。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。