在线客服
热线电话

微信公众号

企业微信
我的购物车 0

谷草转氨酶(GOT)测试盒 BES-BK2545B

谷草转氨酶(GOT)测试盒

销售价
¥ 80.00 /盒
市场价
¥100.00
  • 累计评价

    0
  • 累计销量

    0
配送至
请选择地址
可配送 快递:免邮
服务
博尔森生物科技有限公司-科研服务一站式网站发货并提供售后服务

数量
+ -
库存99盒
二维码图片
商家服务
优质服务 售后无忧
高效物流 安全配送
一站式采购
会员特权 优惠不断
文献奖励

看了又看

  • 吡咯啉-5-羧酸还原酶(P5CR)测试盒 BES-BK2560B

    ¥830.00

  • 鸟氨酸转氨酶(OAT)测试盒 BES-BK2559B

    ¥530.00

  • 赖氨酸(LYS)测试盒 BES-BK2558B

    ¥530.00

 谷草转氨酶(GOT)测试盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

GOT( 2.6.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT 在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。

测定原理

GOT 催化 α-同戊二酸和天门冬氨酸发生转氨基反应,生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与 2,4-二硝基苯肼反应生成 2,4-二硝基苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定 505nm 吸光度的变化,即可计算 GOT 酶活力。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制

提取液:液体 30mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂二:液体 6mL×1 瓶, 4℃保存;

试剂三:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存;

 样品测定的准备

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

测定操作表

1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 505nm,蒸馏水调零。

2、 在 EP 管中加入下列试剂

2021091711242807616

混匀,室温放置 10min,在 505nm 波长处,测各管吸光度 A。ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。

计算

1、标准条件下测定的回归曲线, y = 0.4768x-0.0013 (x 为标准品浓度,umol/mL;y 为ΔA)。

2、血清(浆)GOT 活力的计算

单位的定义:每 mL 血清(浆)每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。

GOT(nmol/min/mL)=(ΔA+0.0013)÷0.4768÷T×103=104.9×(ΔA+0.0013)

3、细胞、细菌和组织中 GOT 活力的计算

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。

GOT(nmol/min/mg prot)=([ ΔA+0.0013)÷0.4786×V1]÷(V1×Cpr)÷T×103 =104.9×(ΔA+0.0013)÷Cpr

需要另外测定,建议使用本公司 BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

(2) 按样本鲜重计算:

单位的定义:每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。

GOT(nmol/min/g 鲜重)=[(ΔA+0.0013)÷0.4768×V1]÷(W×V1÷V2)÷T×103 =104.9×(ΔA+0.0013)÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为一个酶活力单位。

GOT ( nmol/min/104 cell ) =[ ( ΔA+0.0013 ) ÷0.4768×V1]÷(500×V1÷V2)÷T×103 =0.21×(ΔA+0.0013)V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,20min;Cpr:蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500 万;103

:1umol/mL=103nmol/mL。

1、 标准曲线线性范围为:0.01 umol/mL -2 umol/mL。

2、 ΔA 线性范围为:0.01 -2。


因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

  • 全部
  • 商品咨询
  • 支付问题
  • 发票及保修