RIPA裂解液（弱）
RIPA Lysis buffer (weak)

产品编号: BES2018PME

产品规格: 100ml  

保存条件:-20℃避光保存，有效期 12 个月。

产品简介:

RIPA 裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液，裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP 等。蛋白样品可用 BCA Protein Assay Kit (C05-02001) 测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去污剂，不能用 Bradford 法测定 RIPA 裂解后的蛋白浓度。RIPA 裂解液有多种，根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。可参考说明书中“各种裂解液主要特点、差异和选择”选择合适的 RIPA 裂解液或其它裂解液。

本产品为 RIPA 裂解液(弱)。含有 PMSF(100mM, 100×)一支。

使用方法：

(一) 贴壁培养细胞

1. 取 Weak RIPA Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，加入 PMSF 使终浓度为 1mM。

2. 去除贴壁细胞的培养液，低速离心，弃上清。

3. 按照 6 孔板每孔加入 150～250μl 含有 PMSF 的裂解液的比例， 加入 Weak RIPALysis Buffer。移液器轻轻吹打，使裂解液和细胞充分接触。置于冰上或 4℃裂解，通常裂解液作用于细胞 1～3s 内，细胞就会被裂解。

4. 4℃离心（如无低温离心机，室温下离心亦可），取上清。

5. 进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

(二) 悬浮培养细胞

1. 取 Weak RIPA Lysis Buffer 置室温溶解混匀后，使 PMSF 终浓度为 1mM。

2. 低速离心悬浮细胞，弃上清，收集沉淀。

3. 用手指轻弹细胞，使其松散。按照 6 孔板每孔细胞加入 150～250μl 含有 PMSF 的裂解液的比例，加入 Weak RIPA Lysis Buffer。

4. 4℃离心（如无低温离心机，室温下离心亦可），取上清。

5. 进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

(三) 组织样本

1. 取 Weak RIPA Lysis Buffer 置于室温溶解混匀后，加入 PMSF 使终浓度为 1mM。

2. 取在液氮或超低温冰箱中冷冻以上的组织，迅速用液氮研磨，研磨过程尽量控制在1～2min 之内，以减少蛋白的降解。

3. 按照每 20mg 组织加入 150～250μl 裂解液的比例，加入含有 PMSF 的裂解液。冰上或 4℃裂解 15～30min。

4. 4℃离心（如无低温离心机，室温下离心亦可），取上清。

5. 进行后续的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

注意事项：

1. 在贴壁培养细胞的操作步骤中，去除贴壁细胞的培养液后，如果血清中的蛋白没有干扰，可以不用清洗。

2. 如果裂解不充分可以适当增加裂解液的用量，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。

3. 在培养细胞的裂解中，如果细胞量较多，必需分装成 50～100 万细胞/离心管，然后再裂解。

4. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈震荡使样品裂解充分。

5. 溶解 Lysis Buffer 时，应尽量缩短溶解时间，避免裂解液中的有效成分失效。

6. 细胞裂解的操作步骤，应置于冰上或 4℃进行。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。