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Super Kfx DNA Polymerase BES2071CW

Super Kfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,该聚 合酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性

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Super Kfx DNA Polymerase

保存条件:-20℃保存

产品简介

Super Kfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,该聚合酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性。该酶经其他高保真酶改造而来,添加了独特的延伸因子、特异性促进因子,极大提高了扩增能力,克服了普通Pfu酶扩增能力差、产量低和扩增速度慢的缺陷,缩短了反应时间。本品可用于普通片段、长片段及其他各种复杂模板的扩增,扩增得到的PCR产物的3′端不带有“A”碱基,如需进行T/A克隆,需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品适用于基因克隆、二代建库扩增、基因定点突变、SNP等扩增实验。

活性定义:

在74℃,30分钟内,将10 nmoL脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制

经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于98%;经检测无外源核酸酶活性;室温存放一个月,无明显活性改变。

使用方法

以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1. PCR 反应体系

所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分混匀,用完之后请及时放回-20℃保存。

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2. PCR 反应条件

2024010903182560926

注意

1)优先使用三步法扩增,三步法无法扩增目的产物或引物Tm值大于68°C,请尝试两步法。

2)变性:简单模板的预变性98℃,30s-1min,对于复杂的模板,预变性时间可延长至3min。

3)退火:一般实验中退火温度比引物的Tm值低3-5℃,如无法得到理想的扩增效率时,应梯度改变退火温度,进行优化;发生非特异性反应时,适当提高退火温度。

4)延伸:延伸时间应根据所扩增片段的长度和模板复杂程度设定,本产品扩增效率为4-6kb/min,对于长片段及复杂性高的模板建议2-4kb/min。

5)循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数,如果循环次数太少,扩增量不足,循环次数太多,错配机率会增加,所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。

因厂家更改商品包装、场地、附配件等不做提前通知,且每位咨询者购买、提问时间等不同。为此,客服给到的回复仅对提问者3天内有效,其他网友仅供参考!给您带来的不便还请谅解,谢谢!

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