SuperStar Universal SYBR Master Mix

保存条件：-20℃避光冷冻保存。

产品简介

SuperStar Universal SYBR Master Mix 是染料法 (SYBR GreenⅠ) 实时荧光定量 qPCR 反应的专用预混液，反应液浓度为2×，本产品晃动不易产生气泡，此混合物中含有 ROX Reference Dye，可兼容多种 qPCR 仪，反应时只需加入引物和模板，操作简单、便捷。核心组分 SuperFastStar DNA Polymerase 为一种抗体法热启动DNA聚合酶，95℃加热5秒即可恢复DNA聚合酶活性，具有特异性强、检测灵敏度高、可兼容快速扩增程序和小体系扩增等诸多优点。

注意事项

1.使用前请上下颠倒轻轻混匀，并经短暂离心后使用。

2.本品尽量避免反复冻融，不可反复冻融超过10次，以免造成酶活下降。

3.由于本品检测灵敏度极高，易被空气中气溶胶污染。因此反应体系配制时请于超净工作台内进行，配制过程中请使用灭菌枪头、反应管，条件容许的实验室推荐 使用专用的移液枪和带滤芯的枪头。

4.由于本品中含有荧光染料SYBR Green I，配制反应体系时应尽量避免强光照射。

使用方法

以下举例为常规qPCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

反应液的配置：

1）将2×SuperStar Universal SYBR Master Mix设定为反应体系的1/2，其他的组成成份请参照最适条件进行调整。如需改变反应体系的总体积，其他组成成份也应按相同比例改变。 

2）通常引物浓度终浓度为0.2μM可以得到较好结果，可以在终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

3）通常DNA模板的量以1-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。如模板类型为未稀释cDNA原液，使用体积不应超过qPCR反应总体积的1/10。

4）实际配制时，可先将除样品溶液之外的其他组份预混成n+α倍（n为样品数，α为分装损耗）的混合液，然后分到各管（即n管），最后在每管中分别加入相应的样品溶液。

反应程序的设置：

1.反应液制备前，请将试剂完全融解、混匀后再使用。

1）预变性条件适合绝大多数扩增反应，标准程序选择30秒，快速程序最短可选5秒。如模板结构复杂，可将预变性时间延长至3分钟以提高预变性效果。

2）变性：标准程序选择10秒；快速程序最短可选5秒。

3）退火/延伸：标准程序选择30秒；快速程序：对于200bp以内的扩增子，延伸时间最短可设为10秒；超过200bp时，推荐延伸时间为30秒。

4）熔解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI-Q5荧光定量PCR仪为参照设定。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。