植物类黄酮测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
类黄酮是一类多苯化合物,属于植物次生代谢物,对人体具有消炎,抗菌,降血脂,清除体内羟自由基,预防癌症等作用。
测定原理
在碱性亚硝酸盐溶液中,类黄酮与铝离子形成在 510nm 处有特征吸收峰的红色络合物,测定样品提取液在 510nm 处的吸光值,即可计算样品类黄酮含量。
自备实验用品及仪器
天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:60%乙醇,自备。
试剂一:液体 2mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 2mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
类黄酮提取
将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0.02g,加入 2mL 提取液,60℃振荡提取 2h,10000g,25℃,离心 10min,取上清待测。
测定操作表
类黄酮含量计算公式
标准曲线:y = 5.02x+0.0007,R2 = 0.9996
类黄酮含量(mg/g 干重)=(ΔA -0.0007)÷5.02÷(W÷V 样总)= 0.398×(ΔA -0.0007)÷WV 样总:加入提取液体积,2mL; V 样:反应中样品体积,0.54mL; W:样品质量,g最低检出限为 10µg/g。