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植物原花青素测试盒 BES-BK2066B

植物原花青素测试盒

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植物原花青素测试盒

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。

测定原理

在酸性条件下,植物原花青素 A 环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在 500nm 处有特征吸收峰,测定 500nm 光吸收值可计算原花青素的含量。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水、盐酸、无水乙醇和甲醇。

试剂组成和配制

提取液:60%乙醇,自备,4℃保存。(30mL 无水乙醇溶于 20mL 蒸馏水)

试剂一:8%盐酸 20mL,自备,4℃保存。(1.6mL 盐酸溶于 18.4mL 甲醇)

试剂二:粉剂 0.125g×1 瓶,4℃避光保存,临用前加 12.5mL 甲醇溶解。

测定工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合。

空白工作液:临用前按照用量将试剂一和甲醇按照 1:1 混合。

OPC 提取

称取约 0.1g 样本,加入 2mL 提取液,匀浆后,60℃振荡提取 2h,10000g,25℃,离心 10min,取上清待测。

测定操作表

image

OPC 计算公式

标准曲线:y=0.0194x+0.0006,R2=0.999OPC 含量(mg /g 鲜重)=(ΔA-0.0006)÷0.0194×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)×10-3= 0.515×(ΔA -0.0006 ) ÷W

V 样总:加入提取液体积,2mL; V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样品体积,0.2mL; W:样品质量,g

注意事项

1、配制好的试剂二应尽快使用,4℃保存时间不超过一个月。

2、吸光度变化应该控制在 0.05~0.8 之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。

3、最低检出限为 10μg/g。


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