土壤α-葡萄糖苷酶(S-α - GC)测试盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-α-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-α-GC 能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400nm 有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 6mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定步骤:
充分混匀,室温静置 2min 后,400nm 处蒸馏水调零,测定吸光值 A,计算ΔA=A 测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-α-GC 活力计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0032x -0.0027;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC 活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反总÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027)T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:9.25×10
-4 L;W:样本质量,0.05g。