土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)测试盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物,能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫,在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用,是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
测定原理:
S-ASF 能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯酚,后者在 410nm 有特征光吸收。
自备用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:甲苯 5mL×1 瓶,4℃保存(自备);
试剂二:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×2 支,-20℃保存;临用前加入 1.25mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂四:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂五:液体 20mL×1 瓶,4℃保存;
样品处理
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
定步骤:
S-ASF 活力计算:
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0066x -0.013;x 为标准品浓度(μmol/L),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1 μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF 活力(μmol/d /g 土样)= (ΔA+0.013) ÷0.0066×V 反总÷W÷T =19.09×(ΔA+0.013)T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:5.25×10-4
L;W:样本质量,0.1g。