土壤谷氨酰胺酶（S-GLS)测试盒

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

GLS（EC 3.5.1.2）存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。 

测定原理：

S-GLS 催化谷氨酰胺水解成 L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。 

需自备仪器和用品：

台式离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。

试剂组成和配制：

试剂一×1 瓶，8 mL，4 ℃保存；

试剂二×1 瓶，20 mL，4 ℃保存；

试剂三×1 瓶，30 mL，常温保存；

试剂四×1 瓶，10 mL，常温保存；

试剂五×1 瓶，6 mL，常温保存；

试剂六×1瓶，6 mL，常温避光保存。 测定步骤：

1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 420nm，蒸馏水调零。

2、样品测定（在 EP 管中加入下列试剂）：

混匀，室温静置 15min，420nm 处读取测定管和对照管吸光值，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。对照管只要做一管。

注意：试剂六如出现沉淀，静置后取上清使用。

酶活性计算：

标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0084x -0.005；x 为标准品浓度（μmol/mL），y 为吸光值A。

单位定义：每 g 土样每 min 催化谷氨酰胺生成 1μmol 氨定义为一个酶活力单位。

S-GLS（μmol/min/g 土样）＝(ΔA+0.005)÷0.0084×V 反总÷W÷T=0.521×(ΔA +0.005)÷W。

V 反总：反应体系总体积：0.525mL；T：反应时间，2h=120min；W：样本质量，g。