土壤过氧化氢酶(S-CAT)测试盒
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类,在 H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理:
H2O2在 240nm 下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应 S-CAT 活性的高低。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 石英比色皿和蒸馏水
试剂组成和配制:
试剂一:液体 100μL×5 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 9.9mL 蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂 4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 2mL 蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存;
试剂三:液体 6mL×1 瓶,4℃保存。
样品处理:
新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,过 30~50 目筛。
测定步骤:
混匀,用蒸馏水调零,240nm 处记录各管 A 值。
注意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。
S-CAT 活性计算:
单位的定义:每天每 g 风干土样催化 1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(μmol/d/g)=[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=18.9×(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)
V 反总:反应体系总体积,1.145×10-3L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量,0.1g。