土壤木质素过氧化物酶(S-LiP)测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
木质素过氧化物酶(EC1.11.1.14)是一种含亚铁血红素的过氧化物酶,属于木质素降解酶系,在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理
木质素过氧化物酶氧化藜芦醇生成藜芦醛,在 310nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、紫外分光光度计、1 mL 石英比色皿、震荡仪、甲苯。
试剂组成和配制
试剂一:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
样品处理
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。
测定操作(在 2mL EP 管中依次加入下列试剂)
酶活计算公式
酶活性定义:每克土壤每天氧化 1nmol 藜芦醇所需的酶量为一个酶活力单位。
S-LiP 活性(nmol/d/g 土样)=dA×∆ε×V 反总÷W÷T= 1333×△A÷Wε:藜芦醛摩尔消光系数:9300L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应总体积,1.55mL;W:样本质量,g;T:反应时间,3h