液体样本氧化型谷胱甘肽GSSG含量测定试剂盒
产品描述:
液体样本氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽(GSH)的氧化形式,又称为二硫代谷胱甘肽,是两分子的谷胱甘肽 氧化而成。GSSG 会被谷胱甘肽还原酶还原成 GSH,因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。本试剂盒利用谷胱甘肽能和 5,5’- 二硫代-双-(2-硝基ben甲suan)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生 2-硝基-5-巯基ben甲suan,2-硝基-5- 巯基ben甲suan在波长 412nm 处具有zui大光吸收的特点,通过 2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽,然后利 用谷胱甘肽还原酶将 GSSG 还原为 GSH,借此测定氧化型谷胱
技术指标:
最低检出限:1.369 μg/mL 线性范围:1.5625-50 μg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
分析天平、匀浆器/研钵、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿。
注意事项:
1、 样本处理需匀浆完全,若当天不能完成测量,可放-80℃保存。
2、 若不确定样本中 GSSG 含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
3、 此方法利用酶促反应速率计算底物浓度,尽量准确在 30 秒和 150 秒处完成读数。
4、 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
5、 如果样本量过多,可将试剂三与试剂六按照比例混匀配成工作液,在最后一步加入,加入工作液即开始计时。 用多少配多少。
6、 因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量,需另取组织。