组织细胞氧化型谷胱甘肽GSSG含量测定试剂盒
产品描述:
组织细胞氧化型谷胱甘肽GSSG广泛存在于动、植物组织和微生物中,在生物体内能帮助免疫系统保持正常功能,并具有抗氧化和整合解毒的作用。谷胱甘肽有还原型(GSH)和氧化型(GSSG)两种形式,GSSG又称为二硫代谷胱甘肽,由两分子谷胱甘肽氧化而成。GSSG会被谷胱甘肽还原酶还原为GSH,还原型与氧化型谷胱甘肽含量的比值可作为细胞氧化还原状态的主要动态评价指标。
测定步骤:
①分光光度计预热30 min以上,调节波长至412 nm,蒸馏水调零。
②使用前将试剂二37℃(哺乳动物)或25℃(其他物种)预热30 min。
吸光值测定:①充分混匀并立即开始计时,测定30 s时412 nm处吸光值,记为A1测定、A1标准和A1空白;②测定150 s时412 nm处吸光值,记为A2测定、A2标准和A2空白;③计算A测定=A2测定-A1测定,A标准=A2标准-A1标准,A空白=A2空白-A1空白;A测定=A测定-A空白,A标准=A标准-A空白。注:空白组只需测定1-2次。
标准曲线的建立:以50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625 g/mL为横坐标(x),以其对应的A标准为纵坐标(y),绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将A测定带入公式中得到x(g/mL)。
注意事项:
①样品处理过程应在冰上迅速完成,未进行测定的待测样本应置于-80℃保存;
②准确在30 s和150 s处完成吸光值测定,以确保结果的稳定性和重复性;
③提取液中含有蛋白质沉淀剂,待测样本不能用于蛋白浓度测定;
④若测定吸光值超出标准线性吸光值范围:高于最高值建议将待测样本适当稀释后再进行测定;低于最低值建议适当增加样本量后再进行测定,计算时相应修改;
⑤为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定。