液体样本总超氧化物歧化酶SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
产品说明:
超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase, SOD) 能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢和氧气,是生物体内一种重要的抗氧化酶。在生物抗氧化机制中扮演重要角色。目前测定SOD活性常用方法有WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。可以检测细胞或组织匀浆液上清、血浆、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
原理:
WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD酶活力。
适用范围:
血清、血浆、红细胞抽提物等液体样本
组成:
(100次,50次减半)1. SOD检测缓冲液:70ml 2. WST-8: 800ul 3. 酶溶液: 100ul 4. 反应启动液(40X): 60ul
储存:
-20℃避光保存,6个月有效。
操作步骤:
1. 样品准备:(以血浆样本为例) 血浆样品的准备:用抗凝管(肝素钠或EDTA)收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g 离心10分钟,移取上清至另一新的1ml 离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。 2.试剂盒准备: a.WST-8酶工作液的配制:参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:
由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。