7-AAD染色试剂盒
产品简介:
7-Aminoactinomycin D,简称 7-AAD,是一种核酸染料,与 DNA 结合后可发出强烈的荧光,其荧光特性与 PI 相似,可被 488nm 氩离子激光激发,但其发射光谱较 PI 窄,且发射波长更长,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是 PI 的最佳替代品,可与多种 488 激发光激发的荧光染料联合使用,如 FITC,PE 等。
7-AAD 是一种非渗透性荧光染料,可以用来检测无活性的细胞。该染料不能透过活细胞的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜,染料一旦进入细胞,它将结合到细胞内 DNA 分子上,形成具有高荧光性的加成物,可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞,广泛用于流式细胞仪。
7-AAD 最大激发波长为 546nm,最大发射波长为 647nm,可在流式细胞仪下(FL3 通道)检测荧光强度。
产品应用:
1.流式细胞仪
2.荧光显微镜
使用方法:
1.染色液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
6.染色后立即进行分析。
7.7-AAD 染色一般在其它染色完成后再进行,且仅仅染色死细胞。
1. 染色工作液的配制:
根据样品数用相应的培养基或合适的缓冲液(如 HBSS)将 7-AAD 染色液 100 倍-200 倍稀释,配制成染色工作液。
2. 根据自身样本选择合适的步骤制备细胞样本。7-AAD 染色一般在其它染色完成后再进行,且仅仅染色死细胞。
3. 离心收集细胞,用 500μl 染色工作液重悬细胞。
4. 孵育 15-60 分钟。
5. 用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为 545nm,最大发射波长为650nm。可以用 488nm 波长激发。流式细胞仪下(FL3 通道)检测荧光强度。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。