细胞周期检测试剂盒-深红色荧光
产品简介:
细胞周期检测试剂盒是利用细胞内 DNA 能够和荧光染料结合的特性,细胞各个时期其 DNA 含量不同从而结合的荧光染料不同,流式细胞仪检测的荧光强度也不一样来检测细胞周期。
细胞周期(cell cycle)是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,通常由 G0/G1 期、S 期、G2 期和 M 期组成。G1 期:细胞开始 RNA 和蛋白质的合成,但 DNA含量仍保持二倍体。S 期:DNA 开始合成,这时细胞核内 DNA 的含量介于 G1 期和 G2 期之间。当 DNA 复制结束成为 4 倍体时,细胞进入 G2 期。G2 期的细胞继续合成 RNA 及蛋白质,直到进入 M 期。因此,单纯从 DNA 含量无法区分 G2 期和 M 期。一旦有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,这两个细胞或者进入下一个细胞周期,或者进入静止期(G0 期),而 G0 期 从 DNA 含 量 上 同 样 无 法 与 G1 期 区 分 。 因 此 , 整 个 复 制 周 期 可 以 描 述 为G0/G1、S、G2/M 期。通过核酸染料 PI 标记 DNA,并由流式细胞仪进行分析,可以得到细胞各个时期的分布状态,计算出 G0/G1%、S%、G2/M%,了解增殖能力,在肿瘤病理学研究中,通常以 S 期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。
产品应用:
流式细胞仪
使用方法:
1.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
2.最好使用含 EDTA 的细胞消化液。
3.洗涤细胞离心转速不可超过 800×g。
4.乙醇固定时离心大概采用 2000×g 力 5 分钟,离心力太小可能部分细胞难以沉淀。
5.固定时在振荡器上轻轻振荡细胞,并缓慢滴加 75%乙醇,直接加入会导致细胞团聚的现象,很难重悬成单细胞。或者先用冷 PBS 悬浮细胞,充分悬浮,使细胞充分分散成单细胞。之后缓慢加入无水乙醇,终浓度为70-90%乙醇。乙醇固定之后须无细胞沉淀。
常见问题分析:
1.染色后找不到细胞?
固定细胞可能难以离心沉淀;固定细胞可能成团;固定细胞膜容易损伤成碎片。操作过程中注意以上几点。
2.可以不固定细胞吗?
本试剂盒可以用于非固定细胞的周期检测。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。