MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒

产品简介：

MTS 细胞增殖与毒性检测试剂盒是应用新型的水溶性甲臢化合物[3-（4，5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁），内盐；MTS]快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。

 MTS 被细胞生物还原成一种可溶于组织培养基的甲臢化合物，新陈代谢活跃的活细胞内的脱氢酶类将 MTS 转化成液态可溶的甲臢化合物，这种甲臢化合物在 490nm 的吸收值可以直接在 96 孔板上测量，而不需要另外作处理。由 490nm 测量的吸收值所表示的甲臢产物的数量与培养物中活性细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。

 MTS 溶液可以直接加入到细胞样品中，不需要预配各种成分，MTS 溶液很稳定，对细胞没有毒性，可以长时间孵育细胞。MTS 法测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的灵敏度高，无放射性，检测细胞增殖实验的灵敏度比其它方法如 MTT, XTT 和 WST-1 高。

 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

酶标仪

产品特点：

1.易于使用：直接将 MTS 溶液，加入到细胞中，孵育然后读取吸光度值。

2.快速：在 96 孔板中进行检测，不需洗涤或收获细胞。也不需要溶解步骤。因为 MTS 甲臢产物可溶解在组织培养基中。

3.非放射性：不需液闪混合液，不需处理放射性废物（不像[3H]-胸腺嘧啶）。

4.灵活：平板被读数后还可以放回温箱继续颜色反应（不像 MTT）。

5.安全：不需要挥发性有机溶剂来溶解甲臢化合物（不像 MTT）。

使用方法：

1.需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

2.用培养基或 PBS 来配制待检测药物。

3.如果待测药物可能有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm 处的空白吸光度。

如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

5.加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

6.如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

7.有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔间的差异。加 MTS 试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基液面下加，容易产生气泡，会干扰 O.D 值读数。

活性测定使用方法：

1. 收集细胞，加细胞悬液 100 μl（约 5000-10000 个细胞）到 96 孔板（边缘孔用无菌水或 PBS 填充）。每板设对照（加 100l 培养基）。

2. 置 37℃，5% CO2 孵育过夜，倒置显微镜下观察。

3. 每孔加入 10 μl 待检测药物溶液， 37℃孵育。

4. 每孔加入 10 μl MTS 溶液，37℃孵育 1-4 小时。

5. 测定 490 nm 各孔的吸光值。

6. 同时设置空白孔（培养基和 MTS 溶液，无细胞），对照孔（不加药培养基和 MTS 溶液，有细胞），每组设定 3-5 复孔。 

结果分析 ：

细胞活力计算：

将各测试孔的 OD 值减去调零孔 OD 值或对照孔 OD 值。各重复孔的 OD 值取平均数。 

细胞活力% =（加药细胞 OD-空白 OD/对照细胞 OD-空白 OD）×100

常见问题分析：

1.检测时需要换液吗？

如果待测药物有还原性，需要换液，否则不需要。

2.如何判断待测药物是否含有还原性？

测定不含细胞，仅含有待测药物的溶液加入 MTS 反应后的在 490 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小，说明待测药物没有还原性或还原性很小，对 MTS 没有影响，则可以不换液，在培养基中直接加入 MTS ；如果吸光度相对较大，说明药物具有较强的还原性，则需要除去含药物的培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10μl MTS 进行检测。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。