LDH细胞毒性检测试剂盒

产品简介：

LDH 乳酸脱氢酶检测试剂盒是利用 LDH 催化乳酸生成丙酮酸和NADH，NADH 通过电子载体将显色剂还原生成显色物质，在 450nm 处的 OD 值与 LDH 成

正比，利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的 LDH 漏出情况。

LDH（乳酸脱氢酶）是存在于细胞质的一种酶，LDH 释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。当细胞膜受到损伤时，LDH 会释放到培养基中。由于释放出的 LDH 稳定，检测培养基中 LDH 的量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。

 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

1.酶标仪 2.分光光度计

使用方法：

1.LDH 反应液短期存放于 2-8℃，长期存放请分装后-20℃避光保存。

2.LDH 反应液避免反复冻融。

3.LDH 反应液冻存后溶解时注意重新混匀。

4.冷冻会使样品中部分乳酸脱氢酶失活。建议样品准备好后尽量当天完成测定。

5.因为每种细胞的 LDH 量不同，建议通过预实验确定高 LDH 对照和低 LDH 对照的吸光度差异最大的细胞数。

6.培养基中动物血清中的 LDH 会增加背景吸收，建议设置一个培养基背景对照来校正。

7.动物血清中的 LDH 活性较高时，可以通过降低血清浓度来减小其中的 LDH 造成的背景吸收，一般将血清浓度降低到 5%会显著减小背景。

8.细胞过度生长、密度过高、离心速度过大、培养箱内外温差过大，都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。

9.若需准确计算出漏出的 LDH 酶活性的绝对活性，请选用其它货号的试剂盒。

10.不同样本的 LDH 漏出情况不一样，需要做预实验确定加入 LDH 反应液后的孵育时间。

11.以下以 96 孔板培养为例，如果是使用的其它类型的培养板，以实际为准，等比例调整吸入对应规格的试剂即可。

12.因为每种细胞的 LDH 量不同，为了得到最好的显色效果，推荐做预实验确定最佳细胞量。没条件做细胞数量优化的话，可以选择较高细胞量实验。

LDH 测定：

1. 吸取 50 μl 用培养基稀释过的细胞悬液至 96 孔板中。

2. 加入 50 μl 含有药物的培养基（按表 A）。

3. 在 37 CO2 ℃ 培养箱内培养合适的时间。

4. 在高 LDH 对照孔、高 LDH 空白对照孔中加入 10 μl LDH 提取液后，在样品、样品空白、低 LDH 对照孔和背景空白孔中加入 10 μl 培养基（按表 A），在 37 CO2 ℃ 培养箱内培养 30-45 分钟。

5. 96 孔板离心 2 min (250×g)，使悬浮细胞沉淀。

6. 从每个孔中吸取 100 μl 上清液至另一个新的 96 孔板中。 

7. 在新的 96 孔板每个孔中加入 10 μl LDH 反应液 B 后，在室温避光的条件下培养 30 分钟-4 小时。 

8. 用酶标仪测定 450 nm 的吸光度。 

LDH 计算：

 计算 待测样品孔-样品空白孔、高 LDH 对照孔-高 LDH 对照空白孔、低 LDH 对照孔-背景空白孔 的吸光度后，算出各种孔的复孔平均值。

细胞损伤率/毒性根据如下公式算出。

细胞损伤率/死亡率/毒性(%) = [(ODA - ODC)/( ODB - ODC)] ×100%其中：

ODA：样品的吸光度 (待测样品孔-样品空白孔)

ODB：高 LDH 对照的吸光度 (高 LDH 对照孔-高 LDH 对照空白孔)

ODC：低 LDH 对照的吸光度 (低 LDH 对照孔-背景空白孔)

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。