细胞核染色试剂 DAPI
产品简介:
DAPI 染色试剂用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA 染色,染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。
DAPI (diamidino-2-phenylindole) 能与双链 DNA 小槽,特别是 AT 碱基结合,也可插入少于3 个连续 AT 碱基对的 DNA 序列中。当它与双链 DNA 结合时,荧光强度增强 20 倍,而与单链 DNA 结合则无荧光增强现象,因此是一种简易、快速和敏感地检测 DNA 的方法。
DAPI 的荧光强度较 Hoechst 低,但荧光稳定性优于 Hoechst;其特异性较溴化乙啶和碘化丙啶高。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的 M 系列、N 系列、L 系列、E 系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
产品应用:
荧光显微镜/激光共聚焦
使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.染色后立即进行分析。
4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
5.本染色液可用于培养细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。
6.根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法,只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。
7.活细胞原位染色可能需要较长时间,可将染液加入培养基后避光孵育 1-4 小时,或更长时间。
8.以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例,细胞染色不需要固定,也可以固定后染色,其他方法请参阅相关资料。
1. 染色工作液的配制:
根据样品数用 PBS 将 DAPI 染色液 10-100 倍稀释,配制成染色工作液。
2. 细胞涂片的制备:
贴壁细胞,可将盖玻片放于培养器皿中,让培养细胞长于玻片上,然后用药物诱导细胞凋亡后取出,用 4%多聚甲醛固定 5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。
对于悬浮细胞,用药物诱导细胞凋亡后,500-1000g 离心 5 分钟收集细胞,用 PBS 洗 2 次,收集调整细胞数为 1X105/ml,涂片或用离心涂片,用 4%多聚甲醛固定 5min;
3. 用 PBS 洗涤涂片两次。
4. 加适量染色工作液于涂片上,室温避光染色 5-20 分钟。
5. 用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为 360nm,最大发射波长为 454nm。
结果分析 :
置于荧光显微镜下用 360nm 激发光观察结果:DAPI 染色呈蓝白色荧光。
早期凋亡细胞呈现核浓缩,染色加深,或核染色质呈新月形聚集于核膜一边;晚期凋亡细胞表现为核碎裂成大小不等的圆形小体,并被细胞膜所包绕,即凋亡小体。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。