细胞核染色试剂 PI

产品简介：

PI 染色试剂用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链 DNA染色，染色后可用荧光显微镜检测或流式细胞仪检测。

 PI 染色液可用于细胞凋亡、周期的检测。Propidium Iodide 是一种 DNA 结合性染料，其激发和发射波长分别为 488nm 和 630nm，产生红色荧光，但无膜通透性，不能透过活细胞膜，只能染死细胞。

 因此，在荧光显微镜下观察，正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。也可采用流式细胞仪利用细胞形态上的改变影响它们

的光散射特性改变进行分析，还可与 RNase A 结合进行细胞周期分析。

 可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

 可以为您提供各种颜色的M 系列、N 系列、L 系列、E系列、G 系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

产品应用：

荧光显微镜/激光共聚焦

使用方法：

1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

3.染色后立即进行分析。

4.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

5.本染色液可用于培养细胞、细胞涂片、石蜡切片、冰冻切片的检测。石蜡切片用常规方法脱蜡、分化、冰冻切片用冰丙酮固定后检测。

6.根据样本情况和下游的检测仪器选择合适的染色方法，只要在染色时染色工作液能充分覆盖细胞样本即可。

7.染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。

8.PI 有毒，操作时要戴上手套。

9.流式检测细胞凋亡时，其 DNA 可染性降低被认为是凋亡细胞的标志之一，但这种 DNA 可染性降低也可能是因为 DNA 含量的降低，或者是因为 DNA 结构的改变使其与染料结合的能力发生改变所致。在分析结果时应该注意。

10.以下以培养细胞的涂片的荧光显微镜检测为例，细胞染色不需要固定，也可以固定后染色，其他方法请参阅相关资料。

1. 染色工作液的配制：

根据样品数用 PBS 将 PI 染色液 50-200 倍稀释，配制成染色工作液。

2. 细胞涂片的制备：

贴壁细胞，可将盖玻片放于培养器皿中，让培养细胞长于玻片上，然后用药物诱导细胞凋亡后取出，用 4%多聚甲醛固定 5min。也可其他方式培养后收集细胞制作涂片检测。

对于悬浮细胞，用药物诱导细胞凋亡后，500-1000g 离心 5 分钟收集细胞，用 PBS 洗 2 次，收集调整细胞数为 1X105/ml，涂片或用离心涂片，用 4%多聚甲醛固定 5min；

3. 用 PBS 洗涤涂片两次。

4. 加适量染色工作液于涂片上，室温避光染色 5-20 分钟。

5. 用荧光显微镜检测结果。染料-DNA 复合物的最大激发波长为 488nm，最大发射波长为 630nm。

结果分析 ：

置于荧光显微镜下用 488nm 激发光观察结果：正常细胞不能着色，早期凋亡细胞呈微弱红光，晚期凋亡细胞红光加强，坏死细胞呈强红色荧光。

流式检测用氩离子激发荧光，激光光波波长为 488nm，发射光波波长大于 630nm，产生红色荧光分析 PI 荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。在前散射光对侧散射光的散点图或地形图上，凋亡细胞与正常细胞相比，前散射光降低，而侧散射光可高可低，与细胞的类型有关；在分析 PI 荧光的直方图时，先用门技术排除成双或聚集的细胞以及发微弱荧光的细胞碎片，在 PI 荧光的直方图上，凋亡细胞在 G1/G0 期前出现一亚二倍体峰。如以 G1/G0 期所在位置的荧光强度为 1.0，则一个典型的凋亡细胞样本其亚二倍体峰的荧光强度为 0.45，可用鸡和鲑鱼的红细胞的 PI 荧光强度做参照标准，两者分别为 0.35 和 0.7，可以确保在两者之间的不是细胞碎片而是完整的细胞。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。