膜蛋白纯化试剂盒

产品简介：

跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。

 膜蛋白纯化试剂盒适用于从各类蛋白样品中纯化膜蛋白，包括动物、植物、细菌、真菌、酵母等蛋白粗样品，纯化过程简单方便，可在 1 小时内完成。经纯化后的膜蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。

 纯化的膜蛋白可用于 Western Blotting 等蛋白研究。

本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于 2D 电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用其他货号的试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于 2D 电泳，用脱盐柱脱盐处理。

 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。

 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。

 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于 Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down 实验的试剂盒等总计 300 多种蛋白提取试剂盒供选择使用。

还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。

使用方法：

1.可以根据自己实验需要加入蛋白酶抑制剂。

1. 取约 1-3mg 冻干蛋白样品，用 100ul 蛋白溶解液 C 充分溶解。若是液体蛋白样品，此步骤省略。

2. 在 100ul 溶解的蛋白样品中（或者直接取 100-200ul 蛋白样品）加入 200μl 冷的试剂 A，充分混匀。

3. 在 37℃水浴 5-10 分钟，37℃下 2000g 离心 5 分钟，此时溶液分应分为两层，下层约为 30μl-50ul。

4. 小心收集上层留作备用分析。

5. 在下层液体中加入 80-150μl 试剂 B，充分混匀，即得膜蛋白。

6. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

常见问题分析：

1.蛋白浓度低？

膜蛋白丰度比较低，在条件允许的情况下，需要尽可能加大细胞的上样量以提高膜蛋白浓度。

2.用什么方法定量蛋白？

建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法，因为试剂中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用 Bradford 法定量。

3.膜蛋白电泳没有条带？

膜蛋白样品通常浓度较低，电泳前一定要进行蛋白定量，以保证电泳是蛋白上样量足够。

膜蛋白提取好后，用溶解液充分溶解后，可以超声处理一下，再进行蛋白定量。

蛋白加 Loading buffer 后可以不用煮沸，采用 50℃保温 30 分钟。

蛋白 Loading buffer 中 SDS 终浓度含量可以提高至 3%-10%。

有些样品的膜蛋白含量太低，可以使用丙酮沉淀膜蛋白，再使膜蛋白溶解于上样缓冲液中，一般可以跑出清晰的蛋白条带。

电泳时最后采用低电压低电流电泳。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。