白蛋白/IgG去除试剂盒
产品简介:
白蛋白/IgG 去除试剂盒提供全套试剂,适合从血清/血浆样本中快速去除白蛋白。
血清蛋白和血浆蛋白是人体指标检测的重点,也是科学研究的热点。常用的技术如电泳、2D 电泳、液相色谱、质谱在这些研究中得到广泛的应用,这些技术对上样量中的蛋白总量都有限制,而血清蛋白中超过 50%的蛋白是白蛋白,会对其它低丰度蛋白的检测造成极大的干扰,这就迫使大家寻找方法来富集目标蛋白,去除白蛋白。
本试剂盒提取的蛋白可用于 Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA 实验等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于 2D 电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用其他货号的试剂盒。也可以将最后样品除盐后再用于 2D 电泳,用脱盐柱脱盐处理。
本试剂盒提取的蛋白对蛋白的活性有影响,不可用于酶活性测定等下游蛋白研究实验。如下游实验需要酶活性测定,请使用其他货号的试剂盒。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于 Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down 实验的试剂盒等总计 300 多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
还可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
产品特点:
1.简单,不需要除离心机以外的特殊仪器设备,可平行处理多个样品。
2.高效,一次能有效去除 60%左右的白蛋白,有利于检测低丰度蛋白。
3.得到的样品与后面的研究方法(如 2D 电泳、Mass Spectrometry 等)兼容。
4.可以放量操作,经济实惠,价格比国外同类产品便宜一半以上。
使用方法:
1.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
2.离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有 RPM 和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米)
例如: 转速为 3000rpm,有效离心半径为 10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
1. 取待处理的血清样本 200ul,在 4℃,15000×g 条件下离心 15 分钟.
2. 小心移除上层脂质层,吸取中间层血清 50ul。
3. 加入 150ul 试剂 A,充分混匀。
4. 在-20℃静置 30-90 min。
5. 在 4℃,15000×g 离心 20 min。
6. 小心将上清吸出。弃上清,保留沉淀。
7. 将 500ul 冰浴的试剂 B 加入到沉淀中,轻轻振荡混匀。冰上放置 15min。
8. 在 4℃,15000×g 离心 20 min。小心移除上清,弃上清,保留沉淀。
9. 将 500ul 冰浴的试剂 B 加入到沉淀中,轻轻振荡混匀。冰上放置 15min。
10. 在 4℃,15000×g 离心 20 min。小心移除上清,弃上清,保留沉淀。
11. 将保留沉淀的离心管开盖静置 15 分钟。晾干。
12. 在沉淀中加入 100-400ul 试剂 C,充分混匀。振荡 5-10 分钟。
13. 在 4℃,12000×g 离心 10 min。弃沉淀,取上清。
14. 上清即为去除了白蛋白的血清蛋白样品。
常见问题分析:
1.检测不到目的蛋白?
有些低丰度的目的蛋白可能会与白蛋白紧密结合,在去除白蛋白的过程中,目的蛋白与白蛋白一起被去除。
可以用 4 倍体积的 20%乙腈对血清进行预处理,分离目的蛋白和白蛋白。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。