增强型ECL化学发光检测试剂盒
产品简介:
增强型 ECL 试剂盒采用高品质进口原料,经大量样本实验验证优化配方。稳定性高,检测方便,可检测 pg 级的抗原。
使用方法:
1.ECL 工作液配制过程中吸取试剂 A 和试剂 B 时务必跟换吸头,工作液新鲜配制后立即使用,放置过久会影响灵敏度。
2.根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
3.曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
4.如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用 ECL 发光和曝光。
5.必须使用高质量保鲜膜。
1. 使用合适的方法进行 Western,直至用 PBST 洗涤二抗。
2. 配制新鲜 ECL 工作液:试剂 A 和试剂 B 按 1:1 混合均匀后即为 ECL 工作液。
3. 印迹膜蛋白面朝上,用 ECL 工作液均匀滴加至印迹膜使其完全覆盖。ECL 工作液使用量大约为
0.125ml/cm2 膜或根据个人实验习惯使用。
4. 用平头镊夹住印迹膜,垂直置于吸水纸以吸去自然流下的多余工作液,注意不能让膜完全干掉。
5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
6. 将印迹膜蛋白面朝上,放于 X 光胶片暗盒内。(如果用显像仪器直接置于仪器中拍照即可)
7. 在暗室内放入 X 光片,曝光,显影。如果在暗室中可肉眼看到比较亮的条带,建议曝光 1 分钟-3 分钟;如果肉眼看到的带比较淡,建议曝光 3-10 分钟;如果很淡或基本看不到带,建议曝光 10 分钟-30 分钟。
常见问题分析:
1.为什么会发生光淬灭?
抗原浓度太高,局部过多的 HRP 会快速消耗底物,导致光信号过强,条带呈灼烧样。可降低抗原上样量。
操作时间过长,膜逐渐干掉。避免膜干掉。
不良的实验习惯导致设备或试剂污染。例如铁锈和不慎沾染的显影液、定影液,会造成光淬灭,甚至直接导致无荧光。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。