外泌体(Exosomes)浓缩试剂盒
产品简介:
外泌体(Exosomes)浓缩试剂盒适用于对各种外泌体样品进行浓缩,提高外泌体浓度。不需要超速离心,仅需通过简单的常规离心即可浓缩外泌体。浓缩后的外泌体可根据实验目的用于后续的蛋白提取等多种实验,应用范围广泛。
外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性小囊泡,直径约为 30-150nm,天然存在于血液、唾液、尿液和母乳等各种体液中,研究发现,Exosome 内含有与细胞来源相关的蛋白质、mRNA 和 microRNA,并且 exosome 能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。
外泌体囊泡已经成为细胞间通讯的重要介质,参与原核生物和高等真核生物细胞之间的生物信号传递,以调节不同范围的生物过程。外泌体囊泡的病理生理作用开始在包括癌症、感染性疾病和神经变性疾病在内的疾病中得到充分认识,显现了外泌体作为疾病的早期诊断、治疗干预的潜在新靶点的巨大应用前景。此外,未修饰和工程化的外泌体囊泡可能在大分子药物递送中具有应用价值。
传统的分离和提取 exosome 的主要方法是超速离心法,这种方法缺点是耗时耗力,往往需要 30-70 个小时,每次最多只能处理 6 个样品,需要大量的起始材料,而且产量不高。
自主开发的外泌体浓缩试剂盒系列产品,可以通过简单离心快速高效获得高纯度外泌体颗粒。本试剂盒提取的外泌体完好无缺,能用于各种功能研究、蛋白分析及 RNA分析、电镜分析、NTA 粒径分析等下游实验应用。
本试剂盒按每个样本处理 2ml 低浓度外泌体悬液计,每个 10T 试剂盒大约可以用于浓缩20ml 样品。如果需要处理大量的低浓度外泌体悬液,将浓缩液按原样品体积的 1:4 加入即可。
还可以提供 30 分钟快速浓缩各种外泌体样本的快速浓缩试剂盒产品。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
产品应用:
外泌体研究
使用方法:
1.以下以 2ml 样品为例,实际操作时按样品和浓缩液 A 用量体积比 4:1 使用即可。
2.已经浓缩好的外泌体样本如果需要进行电镜观察,只能冰上或 4℃保存,存放时间不超过两天,注意不可冷冻保存,否则可能会影响电镜观察效果。进行蛋白提取或核酸提取的下游应用可以低温冻存。
3.以下步骤以低浓度的外泌体悬液纯品为例。如果是含有细胞等其它杂质的样品,需要先采用离心等其它方式去除杂质后再浓缩。
1. 在 2ml 待浓缩的低浓度外泌体悬液中加入 0.5ml 浓缩液 A,盖紧离心管盖,上下颠倒混匀 1 分钟左右,使液体充分混匀。
2. 置 2-8℃冰箱静置过夜。
3. 在 4℃条件下,10000×g 离心 60 分钟。
4. 小心移除上清,收集沉淀。
5. 取适量缓冲液将沉淀重悬,即得到浓缩的外泌体样品。
6. 将浓缩的外泌体样本-80℃保存或直接用于下游应用。
常见问题分析:
1.如何鉴定提取的外泌体?
通常使用透射电镜检测(形态)、粒径检测(大小)、外泌体标志蛋白 Western blot 检测等方法鉴定提取的外泌体。
2.外泌体 WB 标志蛋白用什么?
在进行 WB 检测时,通常检测外泌体标志蛋白为 CD63 、CD9 、CD81 、TSG101 、ALIX、HSP70 等。
3.进行外泌体 WB 鉴定时有什么内参蛋白可供选择?
没有,该检测属于定性检测。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。