改良茜素红S法钙盐染色试剂盒
产品简介:
钙盐染色试剂盒采用茜素红 S 法,茜素红 S 属一种蒽醌类衍生物,是茜素磺酸钠盐,它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。茜素红 S 往往对少量的沉积物可得到更可靠的结果。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。钙在人体内大量存在,构成骨骼作为支持人体的支架,在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。除骨骼和牙齿外,正常时钙渗透在所有组织和细胞中,一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情况下,钙析出成固体并沉着于组织内,则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙,其次为碳酸钙。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内 pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
使用方法:
1. 第一次使用本试剂时建议先取 1-2 个样品做预实验。
2. 染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
3. 组织样品固定以中性福尔马林为佳,不宜采用酸性固定液,10%福尔马林固定 4-6 小时进行脱水包埋。
4. 茜素红 S 染色时间要根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下观察,见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗,如染色时间过长,就出现弥散现象,一般 1~2min 即可。
5. 在不溶性钙染色时,茜素红 S 染色时间要根据钙盐的含量来确定。在病理性钙化以及骨化的病理科研实验中常使用该法:如骨折的修复、骨化性肌炎等。
6. 分化和核染色不是必须步骤。
7. 经过茜素红 S 染色液染色后,钙沉积物是双折射的。
8. 茜素红 S 法在辨别和检测少量钙时特别有用,如检查肾中的异常钙化(尿钙过多)。
一、常规染色
1. 组织固定于 10%中性福尔马林,常规脱水包埋。
2. 切片厚度 5μm,常规脱蜡至水。
3. 蒸馏水洗 1min。
4. 切片入茜素红 S 溶液染色 1-5 分钟。
5. 蒸馏水洗 1 分钟。
6. 分化液迅速分化 3-5 秒。
7. 入核染色液染色 1-2 分钟。
8. 流水洗 10 分钟。
9. 常规脱水透明,中性树胶封固。
二、不溶性钙染色:
1. 组织固定于 10%中性福尔马林,常规脱水。
2. 塑料包埋,室温过夜,37℃烤箱中聚合 2~4 天,-20℃冰箱冷却 15~20min。
3. 切片厚度 3~5μm,未脱钙骨切片脱塑至水。
4. 蒸馏水洗 1 分钟。
5. 浸入试剂 A 中,染色 1-10 分钟。
6. 蒸馏水洗 1 分钟。
7. (备选)分化液分化 3-5 秒。
8. (备选)入核染色液染色 1-2 分钟。
9. (备选)流水洗 10 分钟。
10. 常规脱水透明,中性树胶封固。
染色结果:
钙沉积物 橙红色
核 蓝色
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。