MDC染色液

产品简介：

自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器，最终将吞食物在溶酶体内降解的过程，自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构，内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物，损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。

自噬是一种进化上保守的降解过程，可靶向长寿命蛋白、细胞器及其他细胞质组分并通过溶酶体途径进行降解。自噬通路的激活对多种细胞功能都是必需的，包括饥饿状态下的存活、细胞内组分清除、发育及免疫等过程。

单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素，是嗜酸性染色剂，通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂，其检测激发滤光片波长 355nm，阻断滤光片波长 512nm。

MDC 染色液适用于培养细胞的自噬染色，可与 EB 合用双染。

产品组成：

自备材料：

1、低速离心机

2、1.5ml 离心管

3、载玻片、盖玻片

4、荧光显微镜

操作步骤(仅供参考)：

1、收集细胞，用 300～500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 1 次，800～1000g 离心 5min，弃上清。

2、加入适量的 Stain buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/ml。

3、取 90μl 细胞悬液至新的 1.5ml 离心管中，加入 10μl 的 MDC Stain，轻轻混匀。

4、37℃或室温避光染色 15～45min。

5、800～1000g 离心 5min，弃上清，收集细胞，用 300～500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 2 次，800～1000g 离心 5min，弃上清。

6、加入 100μl 的 Wash buffer 重悬细胞，滴加于载玻片上并加盖玻片。

7、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 355nm，阻断滤光片波长 512nm)，计数并拍照。

(二)96 孔板法

1、配制 MDC 染色工作液：按 MDC Stain：Stain buffer=1：9 的比例混合，即为 MDC染色工作液。如不能及时用完，应-20℃避光保存。

2、轻轻吸除 96 孔板中的培养液，加入 100μl MDC 染色工作液至各孔，37℃ 5%CO2 避光孵育 15～60min。

3、各孔加入 100μl Wash buffer 清洗 2～3 次。

4、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 355nm，阻断滤光片波长 512nm)，计数并拍照。

(三)MDC 与 EB 双染法

1、收集细胞，用 300～500μl 的 Wash buffer 清洗细胞 1 次，800～1000g 离心 5min，弃上清。

2、加入适量的 Stain buffer 重悬细胞，计数并调节细胞浓度至 106/ml。

3、取 90μl 细胞悬液至新的 1.5ml 离心管中，加入 10μl 的 MDC Stain 和 0.2uM EB染色液，轻轻混匀。

4、滴加于在玻片上，室温避光染色 15～30min，加盖玻片。

5、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长 512nm)，计数并拍照。

产品货号：BES2209CS

产品规格：2x1ml

有效期：12个月有效。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。