油红O异丙醇饱和液
产品简介:
脂质(Lipid)是中性脂肪、类脂及其衍生物的总称,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有机溶剂(如乙醇、乙醚等)。人体的脂肪主要有两种:1、储存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、肾、胰腺等部位;2、结构脂肪,如类脂(磷脂、糖脂、胆固醇等),主要分布于细胞内,中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油组成的脂类,呈中性,中性脂肪是储存能量的方式之一,在氧化时释放出能量。在正常情况下,除脂肪细胞外,其他细胞在光学显微镜下几乎看不到脂滴,如果细胞质内出现大量脂滴即为脂肪变性,常见于肝细胞、心肌细胞、肾曲管上皮细胞等,中性脂肪染色经常采用苏丹Ⅱ、苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ、苏丹黑B、油红 O 法等。传统方法采用苏丹染料,最近发现偶氮染料油红 O 更适合脂肪的染色,油红 O 是很强的脂溶剂和染脂剂,较易与甘油三脂结合呈小脂滴状,与磷脂结合力稍差,其染色原理一般认为是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色,染料在冰冻切片内脂质的溶解度较原溶剂中的溶解度更大,所以在染色时染料就从有机溶剂转移入脂质而使脂肪染色。
油红 O 染色主要用于显示组织器官的脂肪变性和类脂质的异常沉着,常发生于肝、肾、心等实质脏器的脂肪变性,细胞内出现多数中性脂肪滴;鉴别和诊断脂肪组织中所发生的肿瘤及其性质,标本不采用含有乙醇的固定液(如需要固定可采用 10%福尔马林)、也不采用石蜡切片,需用冰冻切片或碳蜡切片,脂肪的阳性染色结果呈橘黄至红色,但具体颜色因脂质浓度而定。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
自备材料:
1、60%异丙醇、蒸馏水
2、Mayer 苏木素染色液
3、1%盐酸乙醇分化液
4、甘油明胶或阿拉伯糖胶
操作步骤(仅供参考):
1、 按油红 O 异丙醇饱和溶液:蒸馏水=3:2 的比例配制油红 O 染色工作液,易产生沉淀,影响观察,可按需配制后采用静置 20~40min 或 3000rpm 离心 10 分钟,取上清备用。
2、冰冻切片厚度 6~10μm,不固定或 10%福尔马林固定 10min 后水洗,蒸馏水稍冲洗。
3、切片入 60%异丙醇浸洗 20~30s。
4、切片入油红 O 染色工作液(加盖),密闭染色 10~15min。
5、分色:入 60%异丙醇内稍洗以便去除染液,蒸馏水中稍微清洗。
6、入 Mayer 苏木素染色液复染核 1~2min。
7、(可选)1%盐酸溶液稍微分化一下。
8、(可选)自来水漂洗 10min 或稀碳酸锂溶液促蓝。
9、蒸馏水稍微清洗,用滤纸吸干周围水分,甘油明胶或阿拉伯糖胶封固。
染色结果:
注意事项:
1、油红 O 染色工作液不稳定,易产生沉淀,影响染色观察,可按需配制后采用静置20~40min 或 3000rpm 离心 10 分钟取上清备用。
2、如果 60%异丙醇不易获得,亦可采用 70%乙醇。
3、由于脂肪易溶于有机溶剂,显示脂肪一般不能像石蜡切片一样处理,而通过冰冻切片染色来显示。
4、作为脂肪染色的冰冻切片不可太薄,过薄的切片常会使脂质丢失。
5、Mayer 苏木素染色液复染时间不能过长。
6、染色结果不能长期保存,应尽快观察及照相。
7、甘油明胶封固的样本,保存时间不长,如需长期保存,可以在盖玻片与载玻片交界的边缘用中性树胶封闭。
产品货号:BES2013GS
产品规格:100ml
有效期:12个月有效。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。