黑色素切片染色试剂盒(Dopa法)
【产品名称】Melanin Section Staining Kit
【包装规格】 250T/盒
【货号】 BES20149OK
【预期用途】
黑色素在黑色素母细胞内合成。黑色素母细胞起源于神经嵴,在胚胎发育过程中,由神经嵴移行到皮肤、眼和中枢神经系统。因此,在正常情况下皮肤的表皮、毛囊、眼的虹膜、睫状体、脉络膜脑的软脑膜、黑质、迷走背核,以及交感神经节和脊神经节的节细胞内均可有黑色素沉着。在病理情况下可能在全身各处含有黑色索沉着物。黑色素在显微镜下通常不呈黑色,而望黄棕色或棕褐色,其颗粒大小不一。黑色素染色可以用于黑色素的诊断,包括检测神经黑色素、假性黑变病色素等。Dopa黑色素反应法为经过Laidlaw修正之Bloch法(1932年)。此法要求采取新鲜组织或组织固定于5%甲醛液(至多固定2-3h)。用冰冻切片,为预防反应作用受影响,冰冻切片浸水时间不超过数秒钟。本试剂盒根据Dopa黑色素反应法的原理开发。
【它具有下列特点】
1.即开即用,操作简单。
2.本试剂盒可用于切片的显色检测。
3.产品稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀。
4.本产品足够染色250张切片。
5.本产品只用于科研。
【试剂组成】
名 称 | 规 格 |
黑色素切片染色溶液A | 120mL×1 管 |
黑色素切片染色溶液B | 40mL×1 管 |
黑色素切片染色溶液C | 250mL*2管 |
说明书 | 1 份 |
说明:1)不同批号的试剂盒组分不可交互使用。
2)试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数。
【储存条件及有效期】
常温运输,4℃保存,有效期一年。
【自备】 去离子水、95%乙醇、无水乙醇、二甲苯、人工胶。
【使用方法】
1.临用时取1.2ml黑色素切片染色溶液A及0.4ml黑色素切片染色溶液B与5ml黑色素切片染色溶C混合,即成染液。在一定的温度中,反应速度以pH值为转移。当pH值为7.4,温度37.5℃时,则反应在4-5h内完成。若于配制染液时改用1ml黑色素切片染色溶液B,则pH值为7.7;若完全不用黑色素切片染色溶液B,则pH值在8.2,在此碱性溶液中,温度不变则反应在1h内完成。但此加速法促成组织浓染,用缓慢反应可靠。基于上述原因,使用微量碱性的玻璃皿器亦有浓染趋势,使用微量酸性者则不发生反应。因此所用一切器皿必须没有酸碱性反应,绝对保持器皿清洁。
2.浸切片于混合好的染液中约30min,温度37.5℃。
3.更换1次染液(预先贮藏在冰箱中)。
4.每30min镜检1次,2-3h后染液变红色,3-4h后染液变棕色,表明切片染色适宜。
5.水洗。
6.95%乙醇、无水乙醇脱水,二甲苯透明,封固(人工胶最好)。
7.结果:Dopa阳性反应细胞浆(黑素母细胞及白细胞)呈灰色至黑色,黑素不改变颜色,胶原纤维无色或成浅灰色。