2×Super Kfx MasterMix
保存条件:-20℃保存
产品简介
本品为由Super Kfx DNA Polymerase、Mg2+ 、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Super Kfx DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,该酶具有5′-3′DNA聚合酶活性和3′-5′外切酶活性,具有扩增能力强,保真度高,特异性强等优点。2×Mix中添加了独特的扩增增强因子及延伸因子,独特的配方使整个反应体系非常稳定,操作方便,适用于各种片段及模板的扩增。本产品适用于基因克隆、二代建库扩增、基因定点突变、SNP等扩增实验。
质量控制
经检验无外源核酸酶活性,能有效地扩增各种模板;2-8℃存放一个月,无明显活性改变。
使用方法
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1. PCR 反应体系
所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分混匀,用完之后请及时放回-20℃保存。
2. PCR 反应条件
注意
1)优先使用三步法扩增,三步法无法扩增目的产物或引物Tm值大于68°C,请尝试两步法。
2)变性:简单模板的预变性98℃,30s-1min,对于复杂的模板,预变性时间可延长至3min。
3)退火:一般实验中退火温度比引物的Tm值低3-5℃,如无法得到理想的扩增效率时,应梯度改变退火温度,进行优化;发生非特异性反应时,适当提高退火温度。
4)延伸:延伸时间应根据所扩增片段的长度和模板复杂程度设定,本产品扩增效率为4-6kb/min,对于长片段及复杂性高的模板建议2-4kb/min。
5)循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数,如果循环次数太少,扩增量不足,循环次数太多,错配机率会增加,所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
注意事项:该产品仅供科研实验使用,未经允许不得用于其它用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。