HiFiScript All-in-one RT MasterMix for qPCR

保存条件：-20℃保存

产品简介

HiFiScript All-in-one RT Master Mix for qPCR是增加了去除基因组DNA (gDNA)功能的Real Time PCR用逆转录反应试剂盒，使用了本公司新型高效率逆转录酶。 

常见RNA抽提方法纯化的Total RNA中经常会混入微量的gDNA，将其逆转录后获得的cDNA通过Real Time PCR进行基因表达分析时，若检测目的基因中存在假基因，或无法在横跨内含子的位置上设计引物，混入的gDNA会被当作模板扩增，影响扩增结果的准确性。本产品中预混了具有强力DNA分解活性的热敏型DNase，该DNase生效快、效率高、易失活，只需一步操作，即可简便地获得不含gDNA的cDNA。

产品特征

1. 可简便、迅速地去除基因组DNA和合成cDNA

所有去除gDNA反应试剂和逆转录反应试剂已预混，通过单管反应只需约15分钟，即可实现gDNA去除和cDNA合成。

2. 高热稳定性

50℃条件下进行逆转录反应。

3. 可对RNA的整个区域进行均一的逆转录反应

采用了最适用于RealTimePCR用cDNA合成的反应buffer和按最佳比例混合的Primermix（Oligo dT 及 Random Primer），可对RNA的整个区域进行均一、高效率的逆转录。

4. 与Real Time PCR试剂的高适应性

采用了对Real Time PCR的反应体系影响最小的组分，即便向PCR反应液中带入最多20%液量的逆转录反应液，也能显示出很好的线性。因此，该试剂盒适用于低丰度mRNA的检测。

注意事项

1．本产品采用热敏型DNase，请务必将5*HiFiScript All-in-one qRT Master Mx置于冰上。

2.5xHifiScript All-in-one qRT Master Mix使用前请短暂离心收集至管底，并用移液器轻轻吹打充分混匀后，准确吸取。

3，在操作过程中应避免RNase污染，用于逆转录反应和PCR反应的RNase-Free Water，建议和用于其它实验的RNase-Free water分开保存，避免共用。

使用说明

RNA的变性（可选步骤)“

把RNA在65"C条件下热变性5分钟后，立即置于冰上冷却。

*在经过以上步骤的处理后，可提高含有二级结构RNA的逆转录效率，初次实验时，条件。

去除基因组DNA反应和逆转录反应

1.请在冰上配制如下反应液。

本产品是含有逆转录引物（Random Primer及Oligo dT Primer）的预混试剂，不能使用基因特异性引物(Gene Specific Primer)。

2. 将反应液轻轻地搅拌均匀后，按以下温度进行反应。

3．反应结束后，请在4℃或-20°℃(长期）条件下保存，cDNA应避免反复冻融。Real Time

PCR时，作为模板直接或稀释后添加。

·添加到Real Time PCR反应液中的逆转录反应液，请最多不要超过20%。过量的添加会导致Real TimePCR反应效率低下，无法准确地定量。

注意事项：该产品仅供科研实验使用，未经允许不得用于其它用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。