水土中亚硝酸盐含量测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
亚硝酸盐广泛存在于水体和土壤中,不仅是有机氮分解的重要中间产物,也可能来自污染。人体摄入过量后,可诱发消化系统癌变。
测定原理
在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与 N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在 540nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体 100mL×1 瓶,室温保存。
试剂一:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理
1. 土壤样品:准确称取过筛后的土壤约 0.2g,加入 1 .5mL 提取液,室温震荡 1h,8000g,25℃离心 15min,静置,待其分层后,取上清液待测。
2. 水样:直接检测;如果浑浊,可以离心后再测定。
测定步骤和操作表
注意:空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x 为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml) y为吸光值 A。
(1)土壤样品 NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V 样÷(V 样÷V 样总×W)×0.6668 =(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W =4.27×(△A-0.0002)÷W
(2)水样 NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×0.6668 =2.85×(△A-0.0002)V 样总:加入提取液体积,1.5 mL; V 样:反应中样品体积,0.35mL;W:样品质量,g。
注意事项
1. 试剂盒 2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
3. 若检测出得 OD 值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.09 浓缩,A540 > 1.5 适当稀释)。
4. 最低检出限为 0.5μg/g。