食品中亚硝酸盐含量测试盒
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更稳定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。
测定原理
在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与 N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在 540nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵或匀浆器、水浴锅、分光光度计、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液一:液体 50 mL×1 瓶,室温保存。
提取液二:液体 50 mL×1 瓶,室温保存。
提取液三:液体 50 mL×1 瓶,室温保存。
提取液四:粉剂 100 mg ×1 支,室温保存。
试剂一:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品处理
称取样品约 0.2g 鲜重或 0.05g 干重,破碎,加入 0.5 mL 提取液一,沸水浴 15min,冷却至室温,加入 0.5 mL 提取液二,震荡摇匀,加 0.5 mL 提取液三,用镊子加少量粉剂四(约 1mg),静置 30min,25℃,8000g 离心 15 min,取上清液待测。
测定步骤和操作表
注意:空白管只需测定一次。
亚硝酸盐含量计算
标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999 x 为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml) y为吸光值 A。
NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V 样÷(V 样÷V 样总×W)×0.6668 =(△A-0.0002)÷0.234×1.5×0.6668÷W =4.27×(△A-0.0002)÷W
V 样总:加入提取液体积,1.5 mL; V 样:反应中样品体积,0.35mL;W:样品质量,g。
注意事项
1. 试剂盒 2-8℃保存。
2. 试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。
3. △A > 1.5 可以适当稀释样本。
4. 最低检出限为 0.5μg/g。